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活菌總數(shù);
大腸菌群;
大腸桿菌;
腸道桿菌科;
金黃色葡萄球菌;
綠膿桿菌;
沙門氏菌;
李斯特菌;
腸球菌;
亞硫酸鹽還原梭狀芽孢桿菌;
產(chǎn)氣莢膜梭菌;
霉菌(曲霉屬**、曲霉菌);
酵母菌。
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) 實(shí)驗(yàn)動物微生物學(xué)檢測方法
前言
本標(biāo)準(zhǔn)是對GB/T 14926.17-1994《實(shí)驗(yàn)動物綠膿桿菌檢測方法》的修訂。本標(biāo)準(zhǔn)增加了“6.3.5半固體動力試驗(yàn)”和“6.3.6 42℃生長試驗(yàn)”和“5檢驗(yàn)程序”。因血清型鑒別試劑難得，且血清型鑒別只是必要時(shí)才采用，故刪除原標(biāo)準(zhǔn)“5.6血清學(xué)試驗(yàn)”。氧化酶試驗(yàn)陽性是假單胞菌屬的重要生化指標(biāo)，且假單胞菌屬中，產(chǎn)生綠**素是綠膿桿菌的特征。因此，在NAC液體培養(yǎng)中，當(dāng)有綠**素和菌膜產(chǎn)生時(shí)，通過革蘭染色、氧化酶試驗(yàn)可直接判定結(jié)果。
本 標(biāo) 準(zhǔn) 由中華人民共和國科學(xué)技術(shù)部提出并歸口。
本 標(biāo) 準(zhǔn) 起草單位:中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)會負(fù)責(zé)起草。
本 標(biāo) 準(zhǔn) 主要起草人:黃韌。
本 標(biāo) 準(zhǔn) 于1994年1月**發(fā)布口
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T 1492617-2001 實(shí)驗(yàn)動物綠膿桿菌檢測方法
1 范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了實(shí)驗(yàn)動物綠膿桿菌的檢測方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔綠膿桿菌的檢測。
2 引用標(biāo)準(zhǔn)
下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文，通過在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時(shí)，所示版本均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會被修訂，使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)*新版本的可能性。
GB /T 1 4926.42-2001 實(shí)驗(yàn)動物細(xì)菌學(xué)檢測標(biāo)本采集
GB /T 14926.43-2001 實(shí)驗(yàn)動物細(xì)菌學(xué)檢測染色法、培養(yǎng)基和試劑
3 原理
綠 膿 桿 菌是革蘭陰性桿菌，具有產(chǎn)生綠**素和氧化酶等生化試驗(yàn)特征，因此，可利用選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)、菌體檢驗(yàn)和生化試驗(yàn)進(jìn)行鑒定。
4 主要設(shè)備和材料
4.1 普通恒溫培養(yǎng)箱。
4.2 生物顯微鏡。
5 培養(yǎng)基和試劑
5.1 NAC液體培養(yǎng)基。
5.2 NAC瓊脂平皿。
5.3 普通營養(yǎng)瓊脂平皿。
5.4 糖發(fā)酵培養(yǎng)基。
5.5 西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基
5.6 尿素培養(yǎng)基。
5.7 營養(yǎng)明膠。
5.8 氧化酶試劑。
5.9 硝酸鹽培養(yǎng)基。
6 檢測程序
7 操作步驟
7.1 采樣
采取回盲部內(nèi)容物、糞便或病灶組織、分泌物。
7.2 分離培養(yǎng)
將已接種的NAC液體培養(yǎng)基置(36士1)c 培養(yǎng)18 24h 后觀察生長情況，對未產(chǎn)生綠**素者轉(zhuǎn)種NAC瓊脂平皿，(36士1) C培養(yǎng)18 24 h
7.3 鑒定
7.3.1 生長特性及菌落特征
綠膿桿菌在NAC液體培養(yǎng)基中均勻混濁生長、有菌膜、大部分菌株可在培養(yǎng)液上半部形成綠**素;在NAC瓊脂平皿上形成扁平，邊緣不齊呈鋸齒狀，2-3 mm的菌落，大部分菌落可產(chǎn)生綠**素而致使培養(yǎng)基呈綠色，部分菌株需延長培養(yǎng)時(shí)間方可產(chǎn)生色素。
7.3.2 菌體特征
革蘭陰性桿菌，菌體長短不一。
7.3.3 氧化酶試驗(yàn)陽性
被檢菌為革蘭陰性桿菌，氧化酶陽性及產(chǎn)生綠**素，可報(bào)告檢出綠膿桿菌。
7.3.4 生化試驗(yàn)
對不產(chǎn)生綠**素的菌應(yīng)做如下鑒定，見表1
表 1 綠膿桿菌的主要生化特性
7.3.5 半固體動力試驗(yàn)陽性。
7.3.6 42℃生長試驗(yàn)陽性。
8 結(jié)果報(bào)告
凡符合上述各項(xiàng)檢測結(jié)果者作出陽性報(bào)告，不符合者作出陰性報(bào)告。